গ্রাম স্টেনিং একটি দ্রুত কৌশল এবং এটি টিস্যুর নমুনায় ব্যাকটেরিয়ার উপস্থিতি দেখতে এবং ব্যাকটেরিয়াগুলিকে গ্রাম-পজিটিভ বা গ্রাম-নেগেটিভ হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করতে ব্যবহৃত হয়, যা তাদের কোষের দেয়ালের রাসায়নিক এবং শারীরিক বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে। ব্যাকটেরিয়া সংক্রমণ নির্ণয়ের প্রথম ধাপ হিসেবে গ্রাম দাগ প্রায় সবসময় ব্যবহৃত হয়।
এই দাগের কৌশলটির নাম ডেনমার্কের বিজ্ঞানী হ্যান্স ক্রিশ্চিয়ান গ্রাম (1853 - 1938) এর নামে রাখা হয়েছে, যিনি 1882 সালে এই কৌশলটি বিকাশ করেছিলেন এবং 1884 সালে এটি একই ধরনের ক্লিনিকাল লক্ষণযুক্ত দুই ধরনের ব্যাকটেরিয়ার মধ্যে পার্থক্য করার কৌশল হিসেবে প্রকাশ করেছিলেন: স্ট্রেপ্টোকোকাস নিউমোনিয়া স্ট্রেপটোকক্কাস নিউমোনিয়া)।
ধাপ
3 এর মধ্যে পদ্ধতি 1: মাইক্রোস্কোপ স্লাইড প্রস্তুত করা
ধাপ 1. পরীক্ষাগারে কাজ করার জন্য প্রস্তুতি নিন।
আপনি যে নমুনা পরীক্ষা করছেন তার ব্যাকটেরিয়া দূষণ রোধ করতে গ্লাভস এবং লম্বা চুলের টাই পরুন। একটি ফিউম হুডের নীচে কর্মক্ষেত্রটি পরিষ্কার করুন, বা অন্য ভাল-বাতাসযুক্ত এলাকায়। Bunsen বার্নার চেক করুন এবং আপনি শুরু করার আগে মাইক্রোস্কোপ সঠিকভাবে কাজ করছে তা নিশ্চিত করুন।
পদক্ষেপ 2. মাইক্রোস্কোপ গ্লাস স্লাইড নির্বীজন।
যদি কাচের স্লাইড নোংরা হয়, তেল এবং ময়লা অপসারণের জন্য সাবান পানি দিয়ে ধুয়ে ফেলুন। ইথানল, গ্লাস ক্লিনার, অথবা আপনার ল্যাবরেটরি দ্বারা ব্যবহৃত অন্য পদ্ধতি দিয়ে স্লাইডগুলি পরিষ্কার করুন।
ধাপ 3. গ্লাস স্লাইডে নমুনা রাখুন।
আপনি একটি মেডিকেল নমুনায় ব্যাকটেরিয়া সনাক্ত করতে সাহায্য করার জন্য গ্রাম দাগ কৌশল ব্যবহার করতে পারেন, অথবা একটি পেট্রি ডিশে জন্মানো ব্যাকটেরিয়ার সংস্কৃতি। সেরা ফলাফলের জন্য, নমুনার পাতলা স্ট্রোকে গ্রাম দাগ ব্যবহার করুন। 24 ঘন্টার কম বয়সী নমুনাগুলি ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়, কারণ বয়স্ক ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষের দেয়াল ক্ষতিগ্রস্ত করতে পারে এবং গ্রাম দাগে সাড়া দিতে পারে না।
- যদি একটি টিস্যু নমুনা ব্যবহার করে, একটি গ্লাস স্লাইডে 1-2 ড্রপ যোগ করুন। অন্য জীবাণুমুক্ত কাচের স্লাইডের প্রান্ত ব্যবহার করে স্লাইড করে নমুনা ছিটানোর একটি পাতলা স্তর তৈরি করতে স্লাইডে সমানভাবে ছড়িয়ে দিন। পরবর্তী ধাপটি করার আগে এটি শুকিয়ে দিন।
- যদি আপনি একটি পেট্রি ডিশ থেকে ব্যাকটেরিয়া গ্রহণ করেন, তাহলে একটি বুনসেন বার্নারে ইনোকুলেশন লুপ জীবাণুমুক্ত করুন যতক্ষণ না এটি জ্বলছে, তারপর এটি ঠান্ডা হতে দিন। স্লাইডে জীবাণুমুক্ত জল ফোঁটাতে লুপ ব্যবহার করুন, তারপর ব্যাকটেরিয়ার একটি ছোট নমুনা সংগ্রহ করার জন্য এটি ব্যবহার করার আগে আবার জীবাণুমুক্ত করুন এবং আবার ঠান্ডা করুন। এর পর আস্তে আস্তে নাড়ুন।
- ঝোলায় প্রস্তুত ব্যাকটেরিয়াগুলিকে আবার একটি ঘূর্ণি ব্যবহার করে নাড়তে হবে, তারপর জল যোগ না করে উপরের মতো ইনোকুলেশন লুপ দিয়ে নেওয়া উচিত।
- যদি আপনার একটি সোয়াব নমুনা থাকে (সাধারণত একটি ছোট তুলা-টিপড হ্যান্ডেল দিয়ে করা হয়), স্পর্শ করুন এবং আলতো করে স্লাইডের উপর সোয়াবটি ঘোরান।
ধাপ 4. সামান্য উচ্চ তাপমাত্রা একটি ভাল স্মিয়ার তৈরি করতে পারে।
তাপ স্লাইডের উপরে ব্যাকটেরিয়া ধরে রাখবে, তাই দাগের প্রক্রিয়ার সময় তারা সহজে দ্রবীভূত হয় না। বুনসেন বার্নারের উপরে স্লাইডটি দ্রুত দুই থেকে তিনবার আলতো চাপুন, অথবা বৈদ্যুতিক স্লাইড হিটারের উপর স্লাইডটি গরম করুন। অতিরিক্ত গরম করবেন না, নমুনা ক্ষতিগ্রস্ত হতে পারে। আপনি যদি বুনসেন বার্নার ব্যবহার করেন তবে এটি একটি বড় কমলা শিখার পরিবর্তে একটি ছোট কিন্তু নীল শিখা হওয়া উচিত।
বিকল্পভাবে, মিথেনল দিয়ে একটি স্মিয়ারও তৈরি করা যায়, শুষ্ক স্মিয়ারে 1-2 ড্রপ মিথেনল যুক্ত করে, খোলা বাতাসে রেখে স্লাইডে অবশিষ্ট মিথেনল শুকিয়ে নিন। এই কৌশলটি কোষের ক্ষতি কমিয়ে দেয় এবং একটি পরিষ্কার স্লাইড ইমেজ ব্যাকগ্রাউন্ড প্রদান করে।
ধাপ 5. রঙিন ট্রে উপর স্লাইড রাখুন।
স্টেইনিং ট্রেগুলি ধাতু, কাচ বা অগভীর প্লাস্টিকের প্লেট দিয়ে তৈরি হয় যার উপরে একটি নরম জাল থাকে। এই জালের উপরে স্লাইডগুলি রাখুন, যাতে আপনি যে তরল ব্যবহার করেন তা ট্রেতে ফেলা যায়।
আপনার যদি রঙের ট্রে না থাকে, তাহলে আপনি বরফের কিউব প্রিন্ট করতে একটি প্লাস্টিকের ট্রেতে একটি স্লাইড রাখতে পারেন।
3 এর পদ্ধতি 2: গ্রাম দাগ প্রক্রিয়া
ধাপ 1. স্মিয়ারের উপর ক্রিস্টাল ভায়োলেট তরল েলে দিন।
স্ফটিক ভায়োলেট ডাইয়ের কয়েক ফোঁটা দিয়ে ব্যাকটেরিয়ার নমুনা স্প্রে করার জন্য একটি পাইপেট ব্যবহার করুন, যা জেন্টিয়ান ভায়োলেট নামেও পরিচিত। 30-60 সেকেন্ডের জন্য রেখে দিন। স্ফটিক ভায়োলেট (কেভি) জলীয় দ্রবণে কেভি+ এবং ক্লোরাইড (ক্ল-) আয়নগুলিতে বিভক্ত হয়। এই আয়নগুলি গ্রাম-পজিটিভ এবং গ্রাম-নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়ার কোষের দেয়াল এবং কোষের ঝিল্লিতে প্রবেশ করে। কেভি+ আয়ন ব্যাকটেরিয়া কোষের নেতিবাচক চার্জযুক্ত উপাদানগুলির সাথে যোগাযোগ করে, কোষগুলিকে বেগুনি রঙ দেয়।
অনেক ল্যাবরেটরিজ "হকার" ক্রিস্টাল ভায়োলেট ব্যবহার করে, যার মধ্যে অ্যামোনিয়াম অক্সালেট থাকে বৃষ্টিপাত রোধ করতে।
ধাপ 2. ক্রিস্টাল ভায়োলেট আলতো করে ধুয়ে ফেলুন।
স্লাইডটি টিল্ট করুন এবং স্লাইডের উপর পাতন বা ট্যাপ জলের একটি ছোট ধারা স্প্রে করার জন্য একটি ওয়াশারের বোতল ব্যবহার করুন। জলটি স্মিয়ারের পৃষ্ঠের উপর দিয়ে প্রবাহিত হওয়া উচিত এবং সরাসরি স্মিয়ারে স্প্রে করা উচিত নয়। অতিরিক্ত ধুয়ে ফেলবেন না। এটি গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ার দাগ দূর করতে পারে।
ধাপ 3. আয়োডিন দিয়ে স্মিয়ার ফ্লাশ করুন, তারপর ধুয়ে ফেলুন।
আয়োডিন দিয়ে স্মিয়ার ফ্লাশ করার জন্য ড্রপার ব্যবহার করুন। কমপক্ষে seconds০ সেকেন্ডের জন্য রেখে দিন, তারপর উপরের মতই সাবধানে ধুয়ে ফেলুন। odণাত্মক চার্জযুক্ত আয়ন আকারে আয়োডিন KV+ এর সাথে যোগাযোগ করে ক্রিস্টাল ভায়োলেট এবং আয়োডিনের মধ্যে একটি বৃহৎ যৌগিক কমপ্লেক্স গঠন করে (CV-I যৌগিক কমপ্লেক্স) কোষের ভিতরের এবং বাইরের স্তরে। যৌগের এই কমপ্লেক্সটি দাগযুক্ত স্থানে কোষের ভিতরে স্ফটিক ভায়োলেটের বেগুনি রঙ ধরে রাখবে।
আয়োডিন একটি ক্ষয়কারী পদার্থ। ইনহেলেশন, ইনজেশন বা ত্বকের সংস্পর্শ এড়িয়ে চলুন।
ধাপ 4. রঙ ব্লিচ যোগ করুন, তারপর দ্রুত ধুয়ে ফেলুন।
অ্যাসিটোন এবং ইথানলের মিশ্রণ 1: 1 সাধারণত এই গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপের জন্য ব্যবহৃত হয়, যা অবশ্যই সাবধানে সময় নির্ধারণ করতে হবে। স্লাইডটি একটি নির্দিষ্ট কোণে রাখুন, তারপরে রঙিন ব্লিচ যোগ করুন যতক্ষণ না ধোয়ার জন্য ব্যবহৃত পানিতে আর বেগুনি দেখা যায়। এটি সাধারণত 10 সেকেন্ডেরও কম সময় নেয়, বা এমনকি কম সময় যদি ব্লিচটিতে অ্যাসিটনের উচ্চ ঘনত্ব থাকে। অবিলম্বে এই ধাপটি বন্ধ করুন, অন্যথায় ছোপ গ্রাম-পজিটিভ এবং নেগেটিভ কোষ থেকে ক্রিস্টাল ভায়োলেটও বের করে দেবে এবং দাগের প্রক্রিয়াটি পুনরাবৃত্তি করতে হবে। পূর্ববর্তী কৌশল ব্যবহার করে যে কোন অতিরিক্ত রঙের ব্লিচ অবিলম্বে ধুয়ে ফেলুন।
- বিশুদ্ধ অ্যাসিটোন (%৫%+) বিকল্প হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে। আপনি যত বেশি এসিটোন ব্যবহার করবেন, তত দ্রুত ব্লিচ কাজ করবে তাই আপনাকে সময়ের দিকে বেশি মনোযোগ দিতে হবে।
- যদি এই ধাপের জন্য সময়ের হিসাব রাখতে আপনার সমস্যা হয়, তাহলে ড্রপ দ্বারা রঙ ব্লিচ ড্রপ যোগ করুন।
ধাপ 5. স্মিয়ারের উপর কাউন্টার-ডাই ছিটিয়ে দিন, তারপর ধুয়ে ফেলুন।
একটি পাল্টা দাগ, সাধারণত সাফ্রানিন বা ফুচসিন, গ্রাম-নেগেটিভ এবং গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ার মধ্যে বৈসাদৃশ্য বাড়ানোর জন্য ব্যবহৃত হয়, ডিকোলোরাইজড (ডিকোলোরাইজড) ব্যাকটেরিয়া, যেমন গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া, গোলাপী বা লাল। কমপক্ষে 45 সেকেন্ডের জন্য ছেড়ে দিন, তারপর ধুয়ে ফেলুন।
Fuchsin নিবিড়ভাবে অনেক গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া, যেমন হিমোফিলাস এসপিপি এবং লেজিওনেলা এসপিপি দাগ করবে। এই পদ্ধতিটি নতুনদের জন্য ভাল।
ধাপ 6. স্লাইড শুকিয়ে নিন।
শুকানোর জন্য আপনি সেগুলো খোলা বাতাসে শুকিয়ে নিতে পারেন, অথবা এই উদ্দেশ্যে বিক্রি করা বাইবেলাস পেপার ব্যবহার করে শুকিয়ে নিতে পারেন।গ্রাম স্টেইনিং প্রক্রিয়া সম্পূর্ণ।
3 এর পদ্ধতি 3: রঙিন ফলাফল পরীক্ষা করা
ধাপ 1. হালকা মাইক্রোস্কোপ প্রস্তুত করুন।
স্লাইডটি মাইক্রোস্কোপের নিচে রাখুন। ব্যাকটেরিয়া আকারে ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়, তাই প্রয়োজনীয় মোট বৃদ্ধি 400x থেকে 1000x পর্যন্ত পরিবর্তিত হবে। একটি তীক্ষ্ণ চিত্রের জন্য নিমজ্জন তেল সহ একটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্স সুপারিশ করা হয়। স্লাইডে নিমজ্জন তেল ফেলে দিন, বুদবুদ তৈরি হতে বাধা দেওয়ার জন্য ড্রপ করার সময় চলাচল এড়ান
তেল নিমজ্জন শুধুমাত্র বিশেষভাবে ডিজাইন করা লেন্সে ব্যবহার করা যায়, "শুকনো" লেন্সগুলিতে নয়।
পদক্ষেপ 2. গ্রাম পজিটিভ এবং গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া চিহ্নিত করার চেষ্টা করুন।
হালকা মাইক্রোস্কোপের নীচে স্লাইডটি পরীক্ষা করুন। গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া বেগুনি রঙের হয়, কারণ স্ফটিক ভায়োলেট পুরু কোষ প্রাচীরের মধ্যে আটকে থাকে। গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া গোলাপী বা লাল রঙের হবে, কারণ স্ফটিক ভায়োলেটটি পাতলা কোষের দেয়াল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়, যেখানে গোলাপী পাল্টা-ছায়া প্রবেশ করে।
- যদি নমুনাটি খুব ঘন হয়, ফলাফলটি একটি মিথ্যা ইতিবাচক হতে পারে। একটি নতুন নমুনা দাগ দিন যদি এটি সমস্ত গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া দেখায়, যাতে ফলাফলটি সঠিক হয়।
- আপনি যদি খুব বেশি রঙের ব্লিচ ব্যবহার করেন, ফলাফলটি একটি মিথ্যা নেতিবাচক হতে পারে। একটি নতুন নমুনা দাগ দিন যদি এটি সমস্ত গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া দেখায়, যাতে ফলাফলটি সঠিক হয়।
ধাপ the। রেফারেন্স ইমেজের সাথে আপনি যে ফলাফলগুলি দেখছেন তার তুলনা করুন।
ব্যাকটেরিয়া দেখতে কেমন তা যদি আপনি না জানেন, তাহলে রেফারেন্স ইমেজের সংগ্রহ অধ্যয়ন করুন, সাধারণত আকৃতি এবং গ্রাম দাগ দ্বারা সাজানো। আপনি [ন্যাশনাল মাইক্রোবিয়াল প্যাথোজেন ডেটাবেস, ফটোতে ব্যাকটেরিয়া এবং অন্যান্য অনেক অনলাইন সাইটে অনলাইন ডেটাবেস দেখতে পারেন। সনাক্তকরণের সুবিধার্থে, নীচে ব্যাকটেরিয়ার উদাহরণ দেওয়া হল যা সাধারণত সম্মুখীন হয় বা রোগ নির্ণয়ের জন্য গুরুত্বপূর্ণ, তাদের গ্রাম অবস্থা এবং আকৃতি অনুযায়ী শ্রেণীবদ্ধ করা হয়।
ধাপ 4. গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া তাদের আকৃতির উপর ভিত্তি করে চিহ্নিত করুন।
ব্যাকটেরিয়াগুলিকে মাইক্রোস্কোপের অধীনে তাদের আকৃতি অনুসারে আরও শ্রেণীবদ্ধ করা হয়, সাধারণত কক্কি (গোলাকার) বা রড (নলাকার) হিসাবে। এখানে গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ার কিছু উদাহরণ রয়েছে (রঙে বেগুনি) তাদের আকৃতি অনুসারে:
- গ্রাম পজিটিভ কোকি সাধারণত স্ট্যাফিলোকোকি (যার অর্থ গ্রুপ কক্কি) বা স্ট্রেপটোকোকি (যার অর্থ চেইন কক্কি)।
- ব্যাসিলাস, ক্লোস্ট্রিডিয়াম, কোরিনব্যাকটেরিয়াম এবং লিস্টেরিয়ার মতো গ্রাম পজিটিভ রড। রড ব্যাকটেরিয়া Actinomyces spp। সাধারণত শাখা বা ফিলামেন্ট থাকে।
ধাপ 5. গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া চিহ্নিত করুন।
গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া (গোলাপি রঙের) প্রায়ই তিনটি গ্রুপে বিভক্ত। Cocci আকৃতির গোলাকার, রড লম্বা এবং পাতলা, যখন coccoid রড মধ্যে হয়।
- গ্রাম নেগেটিভ কক্কি সবচেয়ে সাধারণ হল নিইসেরিয়া এসপিপি।
- গ্রাম-নেগেটিভ রড উদা E. coli, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, Serratia, Proteus, Salmonella, Shigella, Pseudomonas, and many other। Vibrio কলেরা একটি নিয়মিত কাণ্ড বা একটি বাঁকানো কান্ড হিসাবে দেখা যায়।
- গ্রাম-নেগেটিভ "কোককয়েড" (বা "কোকোব্যাসিলি") রডের ব্যাকটেরিয়া যেমন Bordetella, Brucella, Haemophilus এবং Pasteurella
ধাপ 6. ফলাফল মিশ্রিত কিনা সাবধানে পরীক্ষা করুন।
কিছু ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষের দেয়ালের ভঙ্গুরতা বা মোমের প্রকৃতির কারণে সঠিকভাবে রঙ করা কঠিন। এই ব্যাকটেরিয়াগুলি একই কোষে বেগুনি বা গোলাপী রঙের মিশ্রণ বা একই স্মিয়ারের বিভিন্ন কোষের মধ্যে প্রদর্শিত হতে পারে। 24 ঘণ্টারও বেশি বয়সের ব্যাকটেরিয়া নমুনা এই সমস্যা দেখাতে পারে, কিন্তু কিছু ব্যাকটেরিয়া প্রজাতি আছে যেগুলি যে কোনও নমুনার বয়সে রঙ করা কঠিন। এই ব্যাকটেরিয়াগুলিকে সনাক্তকরণের জন্য আরো বিশেষ পরীক্ষার প্রয়োজন হয়, যেমন অ্যাসিড-দ্রুত দাগ, ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতি পর্যবেক্ষণ, টিএসআই সংস্কৃতি মিডিয়া, বা জেনেটিক টেস্টিং।
- Actinomyces, Arthobacter, Corynebacterium, Mycobacterium, and Propionibacterium spp। সবগুলি গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া, কিন্তু প্রায়ই স্পষ্টভাবে দাগযুক্ত হয় না।
- ট্রেপোনেমা, ক্ল্যামিডিয়া এবং রিকেটসিয়া এসপিপি এর মতো ছোট, সরু ব্যাকটেরিয়া। গ্রাম পদ্ধতি দ্বারা দাগ করা কঠিন।
ধাপ 7. কোন অবশিষ্ট ভোগ্য সামগ্রী এবং সরঞ্জাম নিষ্পত্তি।
এই বর্জ্য নিষ্কাশন পদ্ধতি পরীক্ষাগারের মধ্যে পরিবর্তিত হয় এবং ব্যবহৃত উপকরণের উপর নির্ভর করে। সাধারণত, স্টেনিং ট্রেতে থাকা তরলটি বিপজ্জনক বর্জ্য হিসেবে চিহ্নিত বোতলে ফেলা হয়। 10% ব্লিচ দ্রবণে স্লাইডগুলি ভিজিয়ে রাখুন, তারপরে একটি ধারালো পাত্রে ফেলে দিন।
পরামর্শ
- মনে রাখবেন গ্রাম দাগের ফলাফল শুধুমাত্র তখনই ভালো হবে যদি নমুনা ভালো হয়। রোগীদের অবহিত করা গুরুত্বপূর্ণ যাতে তারা একটি ভাল নমুনা প্রদান করতে পারে (যেমন, থুতু ফেলার একটি গভীর কাশি বনাম থুতনির নমুনা পাওয়ার পার্থক্য)।
- একটি রঙ ব্লিচ হিসাবে, ইথানল এসিটোনের চেয়ে ধীরে ধীরে বিক্রিয়া করে।
- নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে মানসম্মত ল্যাবরেটরি প্রবিধান মেনে চলুন।
- অনুশীলনের জন্য একটি গাল সোয়াব ব্যবহার করুন, কারণ এতে গ্রাম-পজিটিভ এবং গ্রাম-নেগেটিভ উভয় ব্যাকটেরিয়া রয়েছে। যদি আপনি শুধুমাত্র এক ধরনের ব্যাকটেরিয়া দেখতে পান, আপনি হয়তো খুব কম বা খুব বেশি ব্লিচ ব্যবহার করছেন।
- আপনি স্লাইড সুরক্ষিত করতে কাঠের clasps ব্যবহার করতে পারেন।
সতর্কবাণী
- এসিটোন এবং ইথানল হল দাহ্য পদার্থ। এসিটোন আপনার হাত থেকে তেল সরিয়ে দেবে, আপনার ত্বকের জন্য অন্যান্য রাসায়নিক শোষণ করা সহজ করে তুলবে। গ্লাভস পরুন এবং সাবধানে ব্যবহার করুন।
- গ্রাম দাগ বা কাউন্টারস্টেইন ধুয়ে ফেলার আগে স্মিয়ার শুকানোর অনুমতি দেবেন না।
তুমি কি চাও
- নেটওয়ার্ক নমুনা
- কাচের স্লাইড
- পিপেট
- ছোট আগুনের উৎস, বা স্লাইড হিটার, বা মিথেনল
- জল
- স্ফটিক বেগুনি
- আয়োডিন
- রঙ ব্লিচ, যেমন অ্যালকোহল বা এসিটোন
- সাফরানিন
